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CO2光照培养箱试验的成功关键在于细节要把控好

点击次数:223发布时间:2021-08-13
   CO2光照培养箱是在常规培养的基础上进行的改进,主要是通过添加CO2来满足微生物培养所需的环境。主要用于组织培养和某些特殊微生物的培养。根据实验要求,将二氧化碳培养框分为水套式和气套式。
  小心培养的细胞就这样死掉了,是个很心痛的事情。其实影响细胞存活率的原因有很多,有时候并不是培养箱本身出了问题,我们的许多操作对细胞培养的结果也是有很大影响的,今天为大家分享一下使用CO2光照培养箱对细胞进行培养时应该注意的问题:
  1.确保所有实验室材料都无菌
  交叉污染是细胞培养的大敌。即使是轻微的污染,也可能毁了几个星期的成果。因培养箱内温暖潮湿,真菌易生长,因此须注意定期清洁。此外,在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,应用酒精擦拭干净,以避免污染。
  2.小心处理您的培养物
  细胞培养的脆弱性怎么强调也不为过。剧烈摇晃,或连续的温度波动可能会对生长产生不利的影响。确保培养箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量避免一次处理多个细胞系,因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成STR图谱分析,以确认细胞系的身份。
  3.在使用前正确解冻细胞
  尽管解冻看起来是个简单的步骤,但须操作得当,以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培养基稀释,以避免造成直接伤害。
  4.使用对数生长期的细胞
  细胞培养过程共有3个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。有活力的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以70-80%的汇合度存在。
  5.利用细胞的代谢特性来优化培养基
  分析使用过的培养基,有助于鉴定必要成分的代谢速率,包括氨基酸和维生素。从细胞生长阶段和蛋白生产阶段收集到的动态代谢图谱可用来平衡基础培养基和添加培养基,指导培养基的重点,有助于蛋白质的生产。
  此外,在使用CO2光照培养箱的过程中应关好培养箱的门,以免气体外泄,影响试验效果,制冷系统停止工作后,用软布擦净工作腔和玻璃观察窗;每次停机前,各控制开关均应处于非工作状态才切断电源,只有做好这些小细节,才能成功的做好实验!
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